乙酰胆碱酯酶抑制率法（GB/T 5009.199-2003）
1.相关试剂的配制及保存
缓冲剂：取1包缓冲剂倒入500mL蒸馏水或纯净水(建议使用哇哈哈纯净水)中摇匀溶解制成磷酸盐缓冲剂，常温保存。
酶 粉：取1瓶酶粉加入10mL缓冲液摇匀溶解，使用时取100μL，0~5℃冷藏保存。
显色剂：取1瓶显色剂加入10mL缓冲液摇匀溶解，使用时取100μL，0~5℃冷藏保存。
底 物：取1瓶底物加入10mL蒸馏水或纯净水摇匀溶解，使用时取100μL，0~5℃冷藏保存。
2.样品提取
取2g蔬菜样品（块茎类取4g），叶菜剪成1cm2左右的碎片，块茎类取横截面或取其表皮，放入取样瓶中，加入10mL缓冲液，震荡1~2min，静置或过滤后上清液为待测样品液。
3.操作步骤
（1）空白对照：取1支试管加入2.5mL缓冲液，然后加入酶液100μL和显色剂100μL，摇匀，37℃恒温静置反应15min加入100μL底物，摇匀后立即倒入比色皿放入仪器进行测定。
（2）样品检测：取1支试管加入2.5mL待测液，然后加入酶液100μL和显色剂100μL，摇匀，37℃恒温静置反应15min加入100μL底物，摇匀后立即倒入比色皿放入仪器进行测定。
4.结果判定
当抑制率＜50%时，表示样品农残未超标；当抑制率≥50%时，表示农残超标，需重复实验，多次重复后仍显示超标，建议使用气相色谱等仪器做进一步的分析。
【注意事项】
缓冲试剂容易结晶，必须充分溶解后才能使用，建议用玻璃棒捣碎。
比色皿必须光面对准光源，手拿磨砂面。
判断仪器和试剂能否正常使用，请按以下操作：取一只试管，加入2.5mL缓冲液，分别加入酶、显色剂，放置10min后加入底物，快速放到比色皿中，点对照检测即可；数值应当在0.3~0.8之间。高于0.8可在酶试剂里加入1mL缓冲液。
从任何试剂瓶吸出的试剂，都不应该再次射回试剂瓶内。
